Monitoraggio delle interazioni di MyoD con co-attivatori e co-repressori trascrizionali e loro localizzazione sub-nucleare durante il differenziamento muscolare

Questo progetto di ricerca si propone di identificare obiettivi molecolari per la manipolazione farmacologica del differenziamento muscolare, una questione fondamentale per pianificare interventi terapeutici per le malattie neuromuscolari e per migliorare l'efficienza della terapia genica muscolare. Gli esperimenti proposti tendono a chiarire la dinamica spazio-temporale dei mutamenti dei complessi proteici contenenti MyoD, con i suoi co-attivatori e co-repressori. Partendo da linee cellulari miogeniche e da colture primarie di cellule satelliti verrà monitorata l’interazione proteina-proteina in cellule vive e la distribuzione sub-nucleare dei complessi proteici endogeni, implicati nella regolazione trascrizionale, attraverso due tecniche di osservazione: FRET e immunofluorescenza. Queste analisi saranno effettuate in differenti condizioni: durante la proliferazione mioblastica, il differenziamento muscolare e dopo stimoli inibitori o promotori del programma miogenico. I risultati potranno dare importanti informazioni sulle dinamiche cellulari di controllo della trascrizione muscolo-specifica in cellule vive