Terapia genica per l’emofilia B mediante vettori adenovirali helper-dipendenti

Lemofilia B euna malattia ereditaria dovuta a difetti nel gene che codifica per il fattore IX, una proteina prodotta dal fegato che promuove la coagulazione del sangue. Diversi tipi di vettori sono stati studiati per la terapia genica dell'emofilia e ciascuno di essi ha mostrato alcune limitazioni. I vettori adenovirali helper-dipendenti sono ottenuti in laboratorio modificando geneticamente gli adenovirus, virus responsabili di comuni infezioni delle prime vie aeree. Nel genoma di questi vettori possono essere introdotte copie di geni umani che il vettore ha la capacita di trasferire nelle cellule epatiche. Una volta introdotti nelle cellule epatiche, questi geni codificano per proteine normali in grado di curare varie malattie genetiche. Tuttavia, per ottenere questo obiettivo, sono necessarie dosi elevate di vettore le quali sono responsabili di effetti collaterali. In questo progetto, proponiamo diverse strategie per superare questo ostacolo. Una prima strategia e basata sulluso di un vettore che esprime il fattore IX ad alti livelli in modo tale che dosi basse e non tossiche di vettore potranno essere adoperate per ottenere un effetto terapeutico. Unaltra strategia consiste nelliniezione diretta del vettore nel fegato, adoperando una metodica simile a quella adoperata di routine per eseguire biopsie epatiche. Mediante questa strategia verranno impiegate dosi molto basse di vettore le quali anche se fossero iniettate per via endovenosa non causerebbero alcun effetti collaterale. Entrambe queste strategie verranno sperimentata in cani affetti da emofilia B. Infine il terzo obiettivo di questo progetto e la valutazione, in topi affetti da emofilia B, dellefficacia e della sicurezza di molecole mutanti di fattore IX dotate di maggiore potenza catalitica. Questultimo obiettivo ha la potenzialita di generare risultati che possono essere applicati ad altri sistemi di vettori per la terapia genica e anche alla terapia con fattore IX ricombinante.