Valutazione pre-clinica di nanoparticelle biocompatibili come sistema di trasporto di oligoribonucleotidi antisenso per indurre il ripristino di distrofina tramite “exon skipping”

La distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è una grave patologia neuromuscolare ereditaria dovuta a mutazioni nel gene distrofina che determinano assenza della proteina. L'approccio terapeutico più promettente al momento per questa patologia si basa sull'utilizzo di oligonucleotidi antisenso (AONs), molecole di RNA che hanno la capacità di legarsi ad una specifica sequenza esonica ed evitare l'inclusione del esone target nel trascritto correggendo così il difetto molecolare e permettendo la sintesi di una proteina funzionale. Un trial pilota in vivo somministrando AONs nudi modificati (2OMePs) ha evidenziato l'efficacia dell'approccio. Sono in corso anche altri trials che utilizzano AONs diversi. Una delle difficoltà maggiori di questo approccio terapeutico è ottenere il trasporto degli AONs al gene target senza che essi vengano degradati. Abbiamo dimostrato nel modello murino mdx che un nuovo tipo di nanoparticelle biocompatibili ( dette T1, con un core di polimetilmetacrilato) è in grado di legare e rilasciare i 2OMePs ottenendo il ripristino di espressione di distrofina in tutto l'organismo. Pertanto lo scopo di questo progetto è di studiare in dettaglio se il complesso nanoparticelle- AONs può essere un composto efficace e sicuro per la terapia della DMD. Per identificare il complesso nanoparticelle- AONs più efficace vari tipi di nanoparticelle con maggiore capacità di legame di AONs saranno valutati nel modello murino mdx. Saranno provate e paragonate diverse vie di somministrazione compresa quella orale e sarà studiata la concentrazione ottimale di AONs per avere un effetto terapeutico prolungato. Saranno condotti studi di farmacocinetica per analizzare la clearance del complesso e studiati i possibili effetti collaterali dello stesso. Inoltre sarà studiato se la trascrizione di altre proteine del sarcolemma è modificata in seguito alla somministrazione dei complessi nanoparticelle-AONs.